Sammendrag
Laks (Salmo salar) er en nøkkelart innen akvakultur. Å legge til rette for optimal velferd og lavt stressnivå er avgjørende for bærekraftige produksjon. Kortisol og kortisolderivater er vist å være pålitelige biomarkører for stressvurdering hos fisk. Selv om tradisjonelle metoder for kortisolmåling er effektive, krever de vanligvis komplekse, arbeidskrevende laboratorieprosedyrer, noe som begrenser deres anvendelighet i feltbruk innen akvakultur. Kolorimetribaserte UV-Vis-spektrofotometriske metoder derimot er et raskt og kostnadseffektivt alternativ, men deres bruk i fiskestudier er fortsatt lite utforsket. Målet med denne studien var derfor å utvikle en enkel og kostnadseffektiv kolorimetrisk analyse for påvisning av fekal tetrahydrokortison (5β-THE), den dominerende kortisolmetabolitten i avføring fra atlantisk laks. Fekalprøver samlet inn over en seksmåneders periode ble først analysert ved hjelp av en validert LC-MS/MS-metode, som viste konsekvent lave 5β-THE-nivåer i ikke-stressede fisk (gjennomsnittlig 533,81 ± 66,7 ng/g). Videre ble en UV-Vis-spektrofotometrisk analyse basert på kvantifisering av 5β-THE som kompleks med blå tetrazolium utviklet. Viktige parametere, som tid, temperatur, løsningsmiddelsystemer og reagenskonsentrasjoner, ble systematisk optimalisert. Metoden viste utmerket linearitet (R2 = 0,997) og tilfredsstillende deteksjonsgrenser (394,75 ng/mL og 498,54 ng/mL for henholdsvis metyl tert-butyleter og tert-amylalkoholsystemer). Deteksjonsgrensene var høyere enn forventet i hydrolyserte fekalprøver, men funnene viser at det trolig kan utvikles en rask, feltbasert metode for stressvurdering ved bruk av råprøver. Fremtidig forskning vil fokusere på å kombinere derivativ spektroskopi, bedre prøveopparbeidelse og bruk av reell-matriks-referanseprøver bestemt med LC-MS/MS for validering av metoden.